Cultura Celular 101
Chamamos as células de blocos de construção da vida porque elas constituem todos os tecidos e partes de nosso corpo. As células podem nos ajudar a combater doenças e constituem o sangue que circula por nosso corpo. Às vezes, uma célula pode se multiplicar rapidamente, causando câncer. Outras vezes, uma célula pode ajudar a criar um novo lote de células para o corpo usar.
Obviamente, as células são importantes, mas como um cientista estuda uma única célula? Uma abordagem é por meio de uma técnica chamada cultura de células. A cultura de células é um processo usado para isolar, ou separar, células de tecido vegetal ou animal e, em seguida, colocá-las em um ambiente onde possam crescer e prosperar. Freqüentemente, você encontrará cientistas que usam cultura de células em laboratórios de biologia, onde usam um frasco de cultura de tecidos (como um lar para as células) e um meio de cultura de células (uma solução líquida que fornece nutrientes).
Os cientistas usam esse equipamento para cultivar ou cultivar as células e mantê-las saudáveis. Existem dois métodos principais usados para cultivar células em um laboratório: uma cultura aderente e uma cultura em suspensão. O método que você escolhe para usar é determinado pela morfologia da célula , que é sua forma e aparência, porque a maneira como uma célula cresce afetará a forma como ela é formada. Vamos discutir as culturas de células em suspensão e aderentes em mais detalhes para um melhor entendimento.
O que são células aderentes?
As células aderentes , também chamadas de células dependentes de ancoragem , são cultivadas em meio de cultura de células enquanto anexadas ao fundo de um frasco de cultura de tecidos. Normalmente, as células que vêm do tecido são consideradas aderentes. Quando as células são adicionadas a um frasco de cultura de tecidos cheio de meio de cultura de células e deixadas em repouso por cerca de um dia, elas começam a se depositar no fundo e se espalhar. À medida que se espalham, as células seguram-se firmemente ao aderir à superfície inferior do frasco.
Para desalojar as células para remoção, os cientistas usam um método mecânico ou químico. O método mecânico envolve a remoção física das células por raspagem celular, que envolve o uso de uma espátula ou raspador para remover delicadamente as células do fundo. Infelizmente, não importa o quão gentil você seja, esse método corre o risco de danificar ou matar algumas células. É por isso que muitos cientistas optam por usar o método químico.
O método químico usa um tipo de solução enzimática, como a tripsina. Este tipo de solução contém enzimas que cortam ou digerem as aderências usadas pela célula para aderir ao fundo do frasco. Depois que as células aderentes forem liberadas, elas irão flutuar no meio.
Passagem Celular
Ao cultivar células usando cultura de células, as células podem precisar passar por uma passagem celular , que é quando você move algumas ou todas as células para um meio novo para abrir espaço para novas células e estimular mais crescimento. Uma vez que as células aderentes aderem ao fundo do frasco, é muito fácil determinar quando essas células precisam de passagem.
Se você ver que as células aderentes encheram completamente o fundo do frasco, isso significa que elas são confluentes – as células cresceram a ponto de não haver espaço para mais. Esta é uma ótima indicação de que é hora de pegar um raspador de células ou frasco de tripsina e dividir as células em vários frascos para obter espaço extra de crescimento.
Como um cientista pode saber se as células não estão mais aderidas ao fundo do frasco? Você pode dizer olhando para o frasco sob um microscópio invertido, que olha para cima no frasco. Pequenos aglomerados flutuando indicam que as células não são mais aderentes, mas agora suspensas em solução.
O que são células de suspensão?
Em nosso corpo, as células fluem naturalmente durante a suspensão. Eles não estão presos a uma superfície, mas flutuam por diferentes áreas do nosso corpo através da corrente sanguínea. Uma célula de suspensão , ou célula independente de ancoragem , refere-se a uma célula que pode ser cultivada por flutuação no meio de cultura de células. Quando você olha para as células em suspensão no microscópio, normalmente verá que elas se parecem com pequenos pontos se movendo na solução líquida. Haverá poucos ou nenhum aglomerado em comparação com uma cultura aderente.
Lembre-se de que, como essas células não são aderentes, será mais difícil saber quando o frasco de células está confluente e é hora de mover as células para um meio novo. Com células suspensas, você pode precisar tingi-las com uma solução, como azul de tripano, para analisá-las ao microscópio.
Além disso, não haverá necessidade de usar uma solução enzimática ou raspador de células ao trabalhar com células em suspensão. Afinal, as células não ficam presas ao frasco, portanto não há necessidade de recorrer a meios mecânicos ou químicos para removê-las. Eles já estão suspensos em solução, o que elimina essa etapa do processo de cultivo celular.
Resumo da lição
Na cultura de células (técnica usada para separar as células do tecido), existem dois métodos básicos para a cultura de células: aderente e suspensão. A morfologia das células sendo cultivadas depende do método que você usa. As células aderentes crescem permanecendo ligadas a um substrato sólido, como o fundo de um frasco de cultura de tecidos. Uma vez que as células aderentes estão aderidas, elas devem ser removidas mecânica ou quimicamente. As células em suspensão flutuam e crescem suspensas no meio de cultura, de modo que não precisam ser removidas mecânica ou quimicamente.
As células em uma cultura podem precisar passar por uma passagem celular , que é quando se tornam confluentes (quando as células cresceram além do espaço) e devem ser movidas para um meio novo para abrir espaço para o crescimento de novas células. Muitas vezes é difícil determinar se as células são confluentes quando suspensas. Usando uma solução de corante como o azul de tripano, você pode dizer se as células suspensas são confluentes e precisam passar por uma passagem.